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關于液相色譜儀色譜柱使用及維護

更新時間:2015-07-24      點擊次數:3150
液相色譜儀色譜柱使用及維護

使用卡套柱時,兩端的卡套應時刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時候都不能將卡套取下來,否則會造成填料的流失。 
     
     卡套柱的安裝(加預柱)
     1.將卡套架套入柱芯
     2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使夾套高于柱芯(見下圖)
     3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
     4.將"子彈頭"預柱放入卡套片內
     5.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手擰緊
     6.然后依同樣的順序連接好柱子的另一端
       平衡色譜柱 
      反相色譜柱在經過出廠測試后是保存在乙腈/水中的。請一定確保您所使用的流動相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲存或運輸過程中可能會干掉,因此在用流動相分析樣品之前,應使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動相中含有緩沖鹽,應注意用純水"過渡"。
       硅膠柱或極性色譜柱在經過出廠測試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動相,請在使用流動相之前用乙醇或異丙醇平衡
       如何平衡色譜柱? 
       平衡過程中,將流速緩慢地提高
       用流動相平衡色譜柱直到獲得穩定的基線(緩沖鹽或離子對試劑度如果較低,則需要較長的時間來平衡)
       色譜柱的再生   進行色譜柱再生時,應使用一個謙價的泵,我們建議不使用您的液相色譜儀上的泵。 
        表1 建議用來沖洗的溶劑體積
        注意:
        
     在對NH2改性的色譜柱進行再生時,由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液*流出。 
     
        **如果簡單的有機溶劑/水的處理不能夠*洗去硅膠表面吸附的雜質,用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。
        色譜柱的維護 
        1.使用預柱保護分析柱(硅膠在極性流動相/離子性流動相中有一定的溶解度)
        2.大多數反相色譜柱的pH穩定范圍是2-7.5,盡量不超過該色譜柱的pH范圍
        3.避免流動相組成及極性的劇烈變化
        4.流動相使用前必須經脫氣和過濾處理
        5.如果使用極性或離子性的緩沖溶液作流動相,應在實驗完畢柱子沖洗干凈,并保存大乙腈中
        6.壓力升高是需要更換預柱的信號

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